在進(jìn)行掃描電鏡觀察前，要對(duì)樣品作相應(yīng)的處理。掃描電鏡樣品制備的主要要求是:盡可能使樣品的表面結(jié)構(gòu)保存好，沒有變形和污染，樣品干燥并且有良好導(dǎo)電性能。

    一、樣品的初步處理

    1、取材

    掃描電鏡來說，樣品可以稍大些，面積可達(dá)8mm×8mm，厚度可達(dá)5mm。對(duì)于掃描電鏡易卷曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等，可固定在濾紙或卡片紙上，以充分暴露待觀察的組織表面。

    2、樣品的清洗

    用掃描電鏡觀察的部位常常是樣品的表面，即組織的游離面。由于樣品取自活體組織，其表面常有血液、組織液或粘液附著，這會(huì)遮蓋樣品的表面結(jié)構(gòu)，影響觀察。因此，在樣品固定之前，要將這些附著物清洗干凈。

    3、固定

    固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同，常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大，固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)。也可用快速冷凍固定。

    4、脫水

    樣品經(jīng)漂洗后用逐級(jí)增高濃度的酒精或丙酮脫水，然后進(jìn)入中間液，一般用醋酸異戊酯作中間液。

    二、樣品的干燥

    掃描電鏡觀察樣品要求在高真空中進(jìn)行。無論是水或脫水溶液，在高真空中都會(huì)產(chǎn)生劇烈地汽化，不僅影響真空度、污染樣品，還會(huì)破壞樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。因此，樣品在用電鏡觀察之前必須進(jìn)行干燥。干燥的方法有以下幾種:

    1、空氣干燥法

    空氣干燥法又稱自然干燥法，就是將經(jīng)過脫水的樣品，讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便易行和節(jié)省時(shí)間;它的主要缺點(diǎn)是在干燥過程中，組織會(huì)由于脫水劑揮發(fā)時(shí)表面張力的作用而產(chǎn)生收縮變形。因此，該方法一般只適用于表面較為堅(jiān)硬的樣品。

    2、臨界點(diǎn)干燥法

    臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí)，其表面張力等于零的特性，使樣品的液體完全汽化，并以氣體方式排掉，來達(dá)到完全干燥的目的。這樣就可以避免表面張力的影響，較好地保存樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。此法操作較為方便，所用的時(shí)間也不算長(zhǎng)，一般約2~3小時(shí)即可完成，所以是常用的干燥方法。

    3、冷凍干燥法

    冷凍干燥法是將經(jīng)過冷凍的樣品置于高真空中，通過升華除去樣品中的水分或脫水劑的過程。冷凍干燥的基礎(chǔ)是冰從樣品中升華，即水分從固態(tài)直接轉(zhuǎn)化為氣態(tài)，不經(jīng)過中間的液態(tài)，不存在氣相和液相之間的表面張力對(duì)樣品的作用，從而減輕在干燥過程中對(duì)樣品的損傷。

    三、樣品的導(dǎo)電處理

    生物樣品經(jīng)過脫水、干燥處理后，其表面不帶電，導(dǎo)電性能也差。用掃描電鏡觀察時(shí)，當(dāng)入射電子束打到樣品上，會(huì)在樣品表面產(chǎn)生電荷的積累，形成充電和放電效應(yīng)，影響對(duì)圖象的觀察和拍照記錄。因此在觀察之前要進(jìn)行導(dǎo)電處理，使樣品表面導(dǎo)電。常用的導(dǎo)電方法有以下幾種:

    1、金屬鍍膜法

    金屬鍍膜法是采用特殊裝置將電阻率小的金屬，如金、鉑、鈀等蒸發(fā)后覆蓋在樣品表面的方法。樣品鍍以金屬膜后，不僅可以防止充電、放電效應(yīng)，還可以減少電子束對(duì)樣品的損傷作用，增加二次電子的產(chǎn)生率，獲得良好的圖象。

    2、組織導(dǎo)電法

    用金屬鍍膜法使樣品表面導(dǎo)電，需要特殊的設(shè)備，操作比較復(fù)雜，同時(shí)對(duì)樣品有一定程度的損傷。為了克服這些不足，有人采用組織導(dǎo)電法(又稱導(dǎo)電染色法)，即利用某些金屬溶液對(duì)生物樣品中的蛋白質(zhì)?脂類和醣類等成分的結(jié)合作用，使樣品表面離子化或產(chǎn)生導(dǎo)電性能好的金屬鹽類化合物，從而提高樣品耐受電子束轟擊的能力和導(dǎo)電率。

上海杰星生物科技有限公司一直專注于金相設(shè)備及材料的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售，獨(dú)立開發(fā)了一系列的金相設(shè)備與金相材料。杰星及其員工在金相學(xué)和材料科學(xué)領(lǐng)域擁有多年豐富的經(jīng)驗(yàn)，在材料微觀結(jié)構(gòu)分析方面做了大量的開創(chuàng)性工作，并積累了豐富的專業(yè)知識(shí)。

德國(guó)古莎（Heraeus Kulzer）和法國(guó)朗普朗（lamplan） 公司是一家國(guó)際著名的公司，其制造的金相耗材世界領(lǐng)先，為國(guó)際金相公司提供OEM產(chǎn)品。我們上海杰星金相是德國(guó)古莎公司金相產(chǎn)品在中國(guó)金相行業(yè)的總代理，我們將以高品質(zhì)的質(zhì)量、優(yōu)質(zhì)的服務(wù)、經(jīng)濟(jì)的價(jià)格為客戶提供古莎進(jìn)口設(shè)備和耗材。

杰星科技不只是銷售金相產(chǎn)品的公司，杰星科技更是能提供完整的金相分析技術(shù)及解決方案的服務(wù)商。公司的金相耗材，品種國(guó)內(nèi)齊全，應(yīng)有盡有。產(chǎn)品的質(zhì)量和性能達(dá)到國(guó)外同類產(chǎn)品的水平，如金剛石懸浮液、冷鑲嵌料等產(chǎn)品性價(jià)比高，受到眾多用戶的一致好評(píng)。
 

杰星金相官網(wǎng)：http://www.cqrichpe.com/

服務(wù)熱線： 13390834960